一起了解下高效液相色譜儀的數據處理方法
點擊次數：1222 更新時間：2022-12-29
高效(xiao)液相色譜儀(HPLC)是(shi)應(ying)用高效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜原理，主(zhu)要用于分析高沸點(dian)不(bu)易揮發的(de)(de)(de)、受熱不(bu)穩定(ding)(ding)的(de)(de)(de)和(he)分子量大的(de)(de)(de)有機化合物的(de)(de)(de)儀器設備。它由(you)儲液(ye)器、泵(beng)(beng)、進(jin)(jin)樣器、色(se)譜柱、檢測器、記錄儀等幾(ji)部(bu)分組(zu)成。儲液(ye)器中(zhong)的(de)(de)(de)流動相(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)(bei)高壓泵(beng)(beng)打入系(xi)統，樣品溶(rong)液(ye)經(jing)進(jin)(jin)樣器進(jin)(jin)入流動相(xiang)(xiang)(xiang)，被(bei)(bei)流動相(xiang)(xiang)(xiang)載入色(se)譜柱(固(gu)定(ding)(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)) 內，由(you)于樣品溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)(de)(de)各組(zu)分在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)具有不(bu)同的(de)(de)(de)分配系(xi)數，在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)對(dui)運動時(shi)，經(jing)過(guo)反(fan)復多(duo)次(ci)的(de)(de)(de)吸附- 解吸的(de)(de)(de)分配過(guo)程，各組(zu)分在移動速(su)度(du)上產生較大的(de)(de)(de)差別(bie)，被(bei)(bei)分離成單個組(zu)分依(yi)次(ci)從柱內流出，通(tong)過(guo)檢測器時(shi)，樣品濃度(du)被(bei)(bei)轉換成電(dian)信號傳(chuan)送(song)到記錄儀，數據以圖(tu)譜形式(shi)打印出來。HPLC廣(guang)泛應(ying)用于生命科學、食(shi)品科學、藥物研究以及環境研究中(zhong)。
高效(xiao)液相色譜儀的(de)(de)校(xiao)正是通(tong)過分析制備的(de)(de)標準樣(yang)品來確定(ding)計算絕(jue)對組分濃度的(de)(de)響應(ying)系數(shu)的(de)(de)過程。
1.外標(biao)法(fa)(fa)：外標(biao)法(fa)(fa)是在空白樣品(pin)(pin)(pin)中(zhong)加入一定量的(de)標(biao)準物質作為對照樣品(pin)(pin)(pin)，與(yu)未知樣品(pin)(pin)(pin)同時進行樣品(pin)(pin)(pin)處理和檢(jian)測，并計(ji)算(suan)出被檢(jian)測成(cheng)分的(de)濃(nong)度(du)的(de)定量方法(fa)(fa)。根據對照品(pin)(pin)(pin)響應值(zhi)與(yu)標(biao)準品(pin)(pin)(pin)濃(nong)度(du)函(han)數的(de)關系(xi)，測定未知試樣中(zhong)的(de)成(cheng)分。
2.內(nei)標法：內(nei)標法是(shi)將一定重量(liang)的(de)純物(wu)質作為內(nei)標物(wu)加(jia)入一定量(liang)的(de)被測(ce)(ce)樣(yang)品混合物(wu)中，對含(han)(han)有內(nei)標物(wu)的(de)樣(yang)品進行高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜儀分(fen)析，測(ce)(ce)定峰面(mian)積和相(xiang)對含(han)(han)量(liang)。分(fen)別測(ce)(ce)定內(nei)標物(wu)和受試(shi)物(wu)的(de)有效(xiao)校(xiao)正系(xi)數，并(bing)按公式計(ji)算受試(shi)物(wu)的(de)含(han)(han)量(liang)。
兩種適合(he)的(de)(de)(de)(de)數據處理方(fang)法的(de)(de)(de)(de)差別為高效液相色譜(pu)儀：內部(bu)標準(zhun)方(fang)法是(shi)將標準(zhun)的(de)(de)(de)(de)標準(zhun)物質作為要求(qiu)的(de)(de)(de)(de)內部(bu)條件(jian)，并以合(he)適的(de)(de)(de)(de)操(cao)作條件(jian)對(dui)樣(yang)品(pin)進行嚴(yan)格(ge)(ge)的(de)(de)(de)(de)試(shi)驗和試(shi)驗結果的(de)(de)(de)(de)檢驗，但對(dui)樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)準(zhun)確操(cao)作條件(jian)和試(shi)驗結果的(de)(de)(de)(de)分析(xi)必須是(shi)嚴(yan)格(ge)(ge)的(de)(de)(de)(de)，而對(dui)樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)內部(bu)標準(zhun)則(ze)不(bu)需要對(dui)樣(yang)品(pin)進行嚴(yan)格(ge)(ge)的(de)(de)(de)(de)校正。
